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PSA是主要由前列腺上皮細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白分解酶,正常情況下被分泌入前列腺液或精液中,以有活性的游離形式(f-PSA)存在,血清中的PSA主要以結(jié)合形式存在。那么,PSA酶免試劑盒怎么使用?
PSA酶免試劑盒用于定量檢測(cè)人血清中PSA。使用方法有兩種,其中一種方法如下:
1、20X洗滌液用水稀釋成工作濃度后4℃保存?zhèn)溆?
2、在酶標(biāo)板架中插入所需數(shù)量的抗體包被酶標(biāo)板條,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品及待檢樣品均需做兩孔,建議再留出兩孔做不加標(biāo)準(zhǔn)品及樣品的空白對(duì)照,未使用的板條重新密封,干燥保存在2-8℃;
3、在適當(dāng)位置加入20ul標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)血清;
4、每孔加入80ul樣品稀釋液,混勻5s,充分混勻是此步的關(guān)鍵;
5、置濕盒中37℃反應(yīng)60min;
6、甩去液體,用洗滌液注滿酶標(biāo)板各孔并保留20秒,甩去液體;
7、重復(fù)上述洗滌過(guò)程2次,快速將酶標(biāo)板用力扣在吸水紙上以去除剩余水滴,如有氣泡用吸球除去;
8 、每孔加入100ul(或2滴)酶標(biāo)抗體;
9 、混勻5s,充分混勻是此步的關(guān)鍵;
10、置濕盒中37℃反應(yīng)30min;
11、重復(fù)上述洗滌過(guò)程3次,快速將酶標(biāo)板用力扣在吸水紙上以去除剩余水滴,如有氣泡用吸球除去;
12、每孔順序加入顯色液A、B各一滴,輕柔混合5s;
13、置濕盒中,37℃避光反應(yīng)15min;
14、每孔加入一滴終止液以終止反應(yīng);
15、輕柔混合10s以使藍(lán)色顯色液完全轉(zhuǎn)變成黃色,注意避免氣泡;
16、30min內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處讀板。
(編輯:liuwei)