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灰樹花——又名舞茸,是是擔(dān)子菌綱、多孔菌科的食、藥兼用蕈菌。本研究觀察灰樹花作用患瘤小鼠對移植性腫瘤的抑制作用,并對抗腫瘤作用的免疫機制進行初步探討。
實驗的材料與方法:
材料:
1、動物昆明小鼠體質(zhì)量為l8~22g,3—4周齡,雌性90只購自佳木斯大學(xué)實驗動物中心。
2、試劑灰樹花多糖針劑,含量>50%,注射用環(huán)磷酰胺(CTX),抗T細胞單克隆抗體L3T4、Lyt-2以及FITC兔抗鼠IgG,小鼠肝腹水瘤細胞系(H22)。
方法:
建立模型本研究設(shè)實驗組(I、Ⅱ、Ⅲ劑量組)和患瘤模型對照組、陽性對照組(CTX),以及正常組,每組15只。灌胃3周后接種,制成模型。
對小鼠H22的抑制作用實驗組按分別按照100、200、400mg/kg灌胃給藥1次/d,陽性對照組給環(huán)磷酰胺100mg/kg,患瘤模型對照組給生理鹽水0.4ml。計算抑瘤率。
脾臟T細胞亞群的檢測分離脾細胞,然后調(diào)整細胞濃度為1X10個/ml,按照操作說明完成后滴片,求出熒光細胞百分率。
結(jié)果:
對小鼠H22的抑制:灰樹花多糖I、Ⅱ、Ⅲ組患瘤動物的瘤重與患瘤模型組相比均有明顯的抑制作用,陽性對照組亦有明顯的抑制作用(P<0.05)。
T細胞亞群的檢測荷瘤鼠的輔助性T細胞L3T4水平明顯下降,抑制性T細胞Lyt-2水平亦顯著下降,L3T4/Lyt-2比值極顯著下降。而灰樹花多糖Ⅱ、Ⅲ組恢復(fù)到正常小鼠水平。
討論:
本研究通過灰樹花多糖對患瘤鼠瘤重等影響的分析,從瘤體比的統(tǒng)計分析結(jié)果更能清楚地說明灰樹花多糖組的作用效果明顯優(yōu)于陽性對照組。本研究發(fā)現(xiàn)患瘤鼠的L3T4和Lyt-2百分率均明顯下降,因此,L3T4/Lyt-2比值亦明顯下降。給予灰樹花多糖后L3T4和Lyt-2百分率均有明顯升高。L3T4百分率恢復(fù)到正常小鼠水平,L3T4/Lyt-2比值明顯升高。灰樹花多糖Ⅱ、Ⅲ組的L3T4/Lyt-2比值恢復(fù)到正常小鼠水平,表明灰樹花多糖具有改善患瘤鼠免疫功能的作用。因此,給予灰樹花多糖升高的Lyt-2或許是TCS表型,證明L3T4在腫瘤免疫中是最為關(guān)鍵的效應(yīng)細胞。
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