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2019年2月20日，& mdash嵌合抗原受體T (CAR-T)細(xì)胞療法在血液腫瘤患者中產(chǎn)生了顯著的療效。然而，該領(lǐng)域的挑戰(zhàn)之一是缺乏一種簡單有效的方法來檢測免疫效應(yīng)細(xì)胞上的CARs。

圖片來源:Sci Rep

最近，南加州大學(xué)凱克醫(yī)學(xué)院的研究人員開發(fā)了一種基于熒光素酶的新方法(稱為Topanga試驗(yàn))，用于檢測T細(xì)胞上CARs的表達(dá)。該方法利用了一種叫做Topanga試劑的重組融合蛋白，由CAR靶標(biāo)的胞外結(jié)構(gòu)域和海洋熒光素酶或其衍生物組成。

這種方法包括用托潘加試劑孵育表達(dá)CAR的細(xì)胞，洗滌幾次并進(jìn)行熒光檢測。該方法可以檢測基于免疫球蛋白或非免疫球蛋白抗原結(jié)合域的CARs。

研究人員還發(fā)現(xiàn)，在Topanga試劑中添加表位標(biāo)簽不僅可以實(shí)現(xiàn)一步純化過程，還可以使這種試劑通過流式細(xì)胞儀檢測CARs細(xì)胞。同時(shí)，含有分泌的Topanga試劑的上清液可直接用于生物發(fā)光檢測或流式細(xì)胞術(shù)檢測，無需任何蛋白質(zhì)純化。

基于此，研究人員認(rèn)為Topanga試驗(yàn)是一種高靈敏度、高特異性、方便、經(jīng)濟(jì)、多功能的檢測CARs的新方法。

接下來，研究人員計(jì)劃研究Topanga試驗(yàn)是否可用于監(jiān)測CAR T細(xì)胞注射到患者體內(nèi)后的擴(kuò)增和維持情況。如果能夠?qū)崿F(xiàn)，不僅可以幫助醫(yī)生找出可能因細(xì)胞擴(kuò)增過快而發(fā)生毒性反應(yīng)的患者，還可以幫助患者找出可能因CAR-T細(xì)胞存在時(shí)間過短而發(fā)生癌癥復(fù)發(fā)的患者。(Bioon.com生物谷)

參考文獻(xiàn):

Preet M. Chaudhary等.一種基于熒光素酶的檢測嵌合抗原受體的新方法.《科學(xué)報(bào)告》(2019年)。DOI:10.1038/s 14598-018-38258-z