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染色體作為遺傳物質(zhì)的載體,在細胞中不是隨機分布的。近年來,越來越多的研究開始關(guān)注染色體的空結(jié)構(gòu)。大量證據(jù)表明,染色體構(gòu)象與基因表達、DNA復(fù)制、DNA損傷修復(fù)和基因組穩(wěn)定性密切相關(guān)。
Hi-C是近年來發(fā)展起來的研究三維基因組學(xué)的利器。它來源于高通量測序技術(shù)和染色體構(gòu)象捕獲技術(shù)的結(jié)合,用于染色體構(gòu)象的分析。
然而,由于構(gòu)建一個高-C庫需要將近一千萬個細胞,這& ldquo遙不可及。數(shù)據(jù)庫的初始量極大地限制了生殖和腫瘤研究領(lǐng)域中微量樣品的染色質(zhì)構(gòu)象分析和研究人員對未知領(lǐng)域的探索。
因此,減少Hi-C數(shù)據(jù)庫構(gòu)建的初始量一直是3D基因組學(xué)研究者想要解決的難題。
率先減少高-C技術(shù)建立數(shù)據(jù)庫& ldquo閾值& rdquo
最近,3D基因組測序技術(shù)的領(lǐng)導(dǎo)者& mdash& mdash安諾基因成功推出10萬細胞級別的Hi-C數(shù)據(jù)庫,率先實現(xiàn)了Hi-C數(shù)據(jù)庫低初始量的產(chǎn)業(yè)化服務(wù),使Hi-C技術(shù)應(yīng)用到更多的研究領(lǐng)域。以下內(nèi)容來自此& ldquo升級版本& rdquo高-C技術(shù)的一些測量數(shù)據(jù):
樣本要求。
樣本類型:細胞(人、小鼠或其他物種)。
文庫構(gòu)建初始量:100,000個交聯(lián)細胞樣品/文庫(約3ug DNA)。
測序平臺:Illumina Hiseq X TEN,PE150。
測得的小數(shù)據(jù)結(jié)果。
10余個人鼠細胞樣本經(jīng)過多輪測試,小數(shù)據(jù)評估結(jié)果顯示,可用于分析的效度(%)在60%以上,最高為83%。
(1)某些人體細胞樣本的結(jié)果顯示。
(2)一些小鼠細胞樣本的結(jié)果顯示。
測量的大數(shù)據(jù)結(jié)果。
隨機測試2個人體細胞樣本的大數(shù)據(jù),分別統(tǒng)計大數(shù)據(jù)的有效比對率和有效數(shù)據(jù)率,符合分析要求。結(jié)果如下:
(1)有效比較率統(tǒng)計。
(2)有效數(shù)據(jù)率統(tǒng)計。
交互式熱圖結(jié)果顯示。
分析小數(shù)據(jù)結(jié)果的交互熱圖。如下圖所示,顯示全基因組Hi-C的交互熱圖。
仍在升級Hi-C技術(shù)。
Anuo Gene于2015年初在國內(nèi)率先推出動物種群Hi-C和單細胞Hi-C測序服務(wù),隨后將人類染色體三維構(gòu)象分辨率提升至1kb級別;同年12月,公司在國內(nèi)首次推出了植物Hi-C測序服務(wù)。
四年來,隨著技術(shù)的不斷提高,很多科學(xué)家利用Anuo基因的Hi-C技術(shù)發(fā)表了自己的研究成果。公司與法國居里研究所、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國科學(xué)院動物研究所、西南大學(xué)、南京醫(yī)科大學(xué)等科研院所達成深度合作,部分成果在《自然》、《分子植物》、《自然通訊》、《基因組生物學(xué)》等期刊發(fā)表,累計of 97.19。
Anuo基因表明,10萬個細胞的產(chǎn)業(yè)化是微細胞Hi-C研發(fā)計劃的關(guān)鍵進展,但這還遠未達到終點,持續(xù)降低Hi-C初始量的研發(fā)仍在繼續(xù)。Hi-C技術(shù)的進一步升級將擴大其應(yīng)用范圍和用戶,有助于克服生命科學(xué)領(lǐng)域更多未解決的問題。